HPLC-ICPMS como ferramenta para determinação de Metalotioneínas e Fitoquelatinas
Palavras-chave:
Metalotioneínas, fitoquelatinas, HPLC-ICP-MS.Resumo
Metalotioneínas e fitoquelatinas são proteínas e peptídeos associados a metais presentes em todos os sistemas biológicos. Geralmente, na presença de certa concentração de metais, elas são produzidas naturalmente pelo organismo. Existem diversas aplicações destes compostos, incluindo sua utilização como indicadores de poluição ambiental, combate a doenças, etc. Para a identificação de metalotioneínas e fitoquelatinas é necessário utilizar um procedimento bem detalhado de análise química, que envolve a extração destes complexos, seguido da separação ou purificação dos compostos extraídos, e por fim, detecção. Dependendo dos objetivos a serem alcançados, se a identificação da apo-forma da biomolécula ou do complexo metálico, diferentes estratégias devem ser usadas. No segundo caso, deve-se ter cuidado especial na preservação da ligação metal-biomolécula durante os procedimentos de preparação das amostras. Com relação ao sistema de detecção, a absorbância UV-VIS, fluorescência ou espectrometria de massas são os mais comumente utilizados. No caso de complexos metálicos, a cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) é técnica mais utilizada para a separação, acoplada a espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS), técnica de detecção de íons metálicos. Este artigo descreve, em linhas gerais, esta técnica e suas aplicações.
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